RNA提取試劑該如何操作呢？下面一起來看看吧

　　RNA提取試劑是從細胞和組織中提取總RNA的即用型試劑，可以提取細菌、植物、動物組織和細胞以及新鮮血液的總RNA。
 

　　那么接下來讓我們來了解一下RNA提取試劑的操作步驟吧
 

　　1.樣品處理：a.植物組織：取新鮮或-70℃凍存100mg組織在液氮中研磨，把粉末加入到1ml裂解液中混勻。
 

　　b.動物組織：取新鮮或-70℃凍存100mg組織加1ml裂解液，用組織研磨杵或勻漿器勻漿處理。
 

　　c.貼壁細胞：直接在培養板中加入裂解液裂解細胞，每106細胞加1ml裂解液。用取樣器吹打混勻。
 

　　d.細胞懸液：離心收集細胞。每106動物、植物和酵母細胞或每107細菌細胞加1ml裂解液混勻。
 

　　e.血液處理：取0.2-1ml新鮮血液加3倍體積紅細胞裂解液，混勻后室溫放置10分鐘，10000rpm離心1分鐘。棄上清，若沉淀含有紅細胞，可加入2倍體積紅細胞裂解液重復裂解步驟。離心后沉淀加入1ml裂解液混勻。
 

　　2.將處理后的樣品在室溫放置5分鐘，使得核酸蛋白復合物分離。
 

　　3.向勻漿樣品中加0.2ml氯仿，蓋好管蓋，劇烈振蕩15秒，室溫放置3-5分鐘。
 

　　4.2-8℃12000rpm離心10分鐘。RNA主要在上層無色的水相中，把水相轉移到新管中，不要吸到沉淀。
 

　　5.吸附柱前處理：在吸附柱中加入500ul洗柱液，室溫放置2分鐘，2-8℃12,000rpm離心2min，棄廢液。
 

　　6.第4步收集的上清中加入200ul無水乙醇混勻，加入吸附柱靜置2分鐘，2-8℃12000rpm離心2min，棄廢液。
 

　　7.向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，2-8℃12,000rpm離心2min，棄廢液。
 

　　8.向吸附柱中加入600ul漂洗液，2-8℃12,000rpm離心2min，棄廢液。
 

　　9.12000rpm離心2min，棄掉收集管，將吸附柱置于室溫放置數分鐘將吸附柱中殘余的漂洗液去除。
 

　　10.將吸附柱放入新管中，向膜中央滴加50-100ulRNasefreeddH2O，室溫放置5min，12000rpm室溫離心2min即得到RNA。
 

　　注意事項：
 

　　1、所有相關器皿耗材都應為RNase-free產品，操作過程要小心，帶口罩、手套避免環境中RNA酶污染樣品。
 

　　2、RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之間，但這并不表示RNA不純，需電泳檢測。