ELISA加樣如何避免氣泡？

通常氣泡都是聚集在酶標板的孔周圍，導致孔中液體不能與孔壁有效接觸，使孔內反應不均一。很多說明書、教科書上也都提到，加樣時要避免出現氣泡，這到底是什么原因呢？因為在做實驗的過程中，有時為了打干凈槍頭里面的液體，很容易產生氣泡，是不是這樣對實驗結果會后什么影響？

1、包被時有氣泡的話，將導致包被不*實際包被量下降--弱陽性甚至假陰性。

2、封閉時有氣泡的話，將導致大量未結合位點的存在，引起非特異性結合--本底增高，假陽性。

3、加樣時有氣泡的話，抗原抗體不能有效的結合--弱陽性甚至假陰性。

4、加二抗時有氣泡的話，抗原抗體不能有效的結合--弱陽性甚至假陰性（競爭法相反----假陽性）。

5、加顯色液時有氣泡的話--－顯色不*。

6、加終止液時有氣泡的話（1、不能*終止反應 2、影響酶標儀比色，OD值增高）

7、洗滌時有氣泡的話，非特異性結合物不能*洗去，做無用功。

避免方法：

1、加樣時盡量靠近孔底（不要接觸孔底），用力均勻，不要過快過猛。

2、封閉時一定要加滿孔。

3、洗滌時一定要加滿孔(重要），氣泡會浮上來最終驅除。手工洗板時一定要吸干水分并用力拍干。